Thermo Scientific Orbitrap Fusion 是賽(sai)默飛(fei)四極桿-靜電場軌道阱-線性離子阱三合一組合式質譜。Fusion使用的Orbitrap為超高場Orbitrap質量分析器，相比于賽默飛其他Orbitrap系列產品，Fusion具有超高分辨、高靈敏度、多級質譜能力，并且配備多種裂解模式（CID、HCD及可升級的ETD），非常適合蛋白質組學中復雜體系的高通量蛋白檢測。

Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一質譜儀是行業高性能質譜儀，靈敏度更強。包含三個質量分析器，四極(ji)桿(gan)、Orbitrap和線性離子阱（LIT）。可用于蛋白質組學、代謝組學和生物制藥領域。

Thermo Orbitrap Fusion三合一(yi)高分辨(bian)質(zhi)譜儀的結構

經液(ye)相色譜(pu)（LC）柱分(fen)離(li)后，化合物(wu)通(tong)過(guo)樣品傳輸線進(jin)入(ru)質(zhi)譜(pu)儀（MS）進(jin)行(xing)電離(li)和分(fen)析。MS可以通(tong)過(guo)執行(xing)MSn實驗來(lai)提(ti)供有關化合物(wu)的質(zhi)荷比（m/z）的信息(xi)以及結構和定量信息(xi)。Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一質(zhi)譜(pu)儀的基本結構包(bao)括(kuo)離(li)子(zi)(zi)源、離(li)子(zi)(zi)光學器件、質(zhi)量分(fen)析儀和檢測器。

離(li)子源

連接到LC的離(li)子(zi)源(yuan)是大(da)氣(qi)壓(ya)電(dian)(dian)離(li)（API）。API源(yuan)用作LC和MS之(zhi)間的接口，包括以下(xia)電(dian)(dian)離(li)技術(shu)：加(jia)熱電(dian)(dian)噴霧電(dian)(dian)離(li)（H-ESI），大(da)氣(qi)壓(ya)化學電(dian)(dian)離(li)（APCI）和大(da)氣(qi)壓(ya)光電(dian)(dian)離(li)（APPI）。除(chu)了(le)API離(li)子(zi)源(yuan)外，在電(dian)(dian)動離(li)子(zi)漏斗后面的API離(li)子(zi)源(yuan)界面中還有第二個離(li)子(zi)源(yuan)（RIS）。

離(li)子光學(xue)器件

離(li)(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)光(guang)(guang)(guang)學(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)器(qi)(qi)件(jian)(jian)將(jiang)氣(qi)相樣品離(li)(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)聚焦(jiao)并加(jia)速(su)進入(ru)質(zhi)量分(fen)析(xi)儀。它包括(kuo)MP00離(li)(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)光(guang)(guang)(guang)學(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)器(qi)(qi)件(jian)(jian)、MP0離(li)(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)光(guang)(guang)(guang)學(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)器(qi)(qi)件(jian)(jian)、MP1離(li)(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)光(guang)(guang)(guang)學(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)器(qi)(qi)件(jian)(jian)、彎曲線(xian)(xian)性阱(jing)(jing)（C型阱(jing)(jing)）、離(li)(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)路由多(duo)(duo)極(ji)(ji)（IRM）、MP3離(li)(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)光(guang)(guang)(guang)學(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)器(qi)(qi)件(jian)(jian)和DC偏移電(dian)壓。MP00離(li)(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)光(guang)(guang)(guang)學(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)器(qi)(qi)件(jian)(jian)包括(kuo)MP00 RF透鏡和L0透鏡，位(wei)于API源接(jie)口和MP0離(li)(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)光(guang)(guang)(guang)學(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)器(qi)(qi)件(jian)(jian)之(zhi)間。MP0離(li)(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)光(guang)(guang)(guang)學(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)系統，也稱為有源束波(bo)導（ABG），將(jiang)來自MP00離(li)(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)光(guang)(guang)(guang)學(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)系統的離(li)(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)沿(yan)中(zhong)(zhong)心軸(zhou)通過(guo)(guo)90度弧線(xian)(xian)傳(chuan)(chuan)(chuan)輸到(dao)四極(ji)(ji)。90度電(dian)弧可通過(guo)(guo)防止中(zhong)(zhong)性物質(zhi)和高速(su)團簇進入(ru)四極(ji)(ji)桿(gan)(gan)來降低噪音。MP1離(li)(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)光(guang)(guang)(guang)學(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)器(qi)(qi)件(jian)(jian)充當離(li)(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)傳(chuan)(chuan)(chuan)輸設備，通過(guo)(guo)MS向棒(bang)施(shi)(shi)加(jia)射頻（RF）電(dian)壓以(yi)產(chan)(chan)生(sheng)電(dian)場，沿(yan)著(zhu)四極(ji)(ji)桿(gan)(gan)的軸(zhou)引導離(li)(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)，從而將(jiang)離(li)(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)從四極(ji)(ji)桿(gan)(gan)傳(chuan)(chuan)(chuan)輸到(dao)C阱(jing)(jing)。進入(ru)C阱(jing)(jing)后，離(li)(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)通過(guo)(guo)與氮氣(qi)碰撞氣(qi)體碰撞而失去其動能，并聚集(ji)在C阱(jing)(jing)的中(zhong)(zhong)心軸(zhou)上。IRM包含一個(ge)安裝在金屬管內的多(duo)(duo)極(ji)(ji)直管，直接(jie)對準C阱(jing)(jing)。將(jiang)電(dian)勢梯度施(shi)(shi)加(jia)到(dao)多(duo)(duo)極(ji)(ji)管以(yi)快(kuai)速(su)提取(qu)離(li)(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)。MP3離(li)(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)光(guang)(guang)(guang)學(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)器(qi)(qi)件(jian)(jian)可以(yi)通過(guo)(guo)將(jiang)射頻電(dian)壓施(shi)(shi)加(jia)到(dao)桿(gan)(gan)上的方(fang)式(shi)把離(li)(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)從IRM傳(chuan)(chuan)(chuan)輸到(dao)雙壓LIT，以(yi)產(chan)(chan)生(sheng)沿(yan)多(duo)(duo)極(ji)(ji)軸(zhou)引導離(li)(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)的電(dian)場。

質量分析儀

Thermo Orbitrap Fusion三合一高分(fen)辨(bian)質譜儀包含三個質量(liang)分(fen)析儀，四極桿(gan)、Orbitrap和LIT。

四(si)極質(zhi)(zhi)量(liang)分析儀（Q1）包含四(si)個圓桿(gan)(gan)。MS向(xiang)桿(gan)(gan)施(shi)(shi)加(jia)RF電(dian)(dian)壓(ya)(ya)和DC偏移電(dian)(dian)壓(ya)(ya)。當將可(ke)(ke)變(bian)幅度的(de)(de)RF和DC電(dian)(dian)壓(ya)(ya)施(shi)(shi)加(jia)到可(ke)(ke)以(yi)產生(sheng)電(dian)(dian)場(chang)的(de)(de)四(si)極桿(gan)(gan)時，電(dian)(dian)場(chang)可(ke)(ke)以(yi)使具(ju)有特定m/z的(de)(de)離(li)子(zi)產生(sheng)穩(wen)定的(de)(de)振(zhen)蕩，而對所(suo)有其他離(li)子(zi)產生(sheng)不穩(wen)定的(de)(de)振(zhen)蕩。即，Q1用作質(zhi)(zhi)量(liang)過濾(lv)器，使選定的(de)(de)離(li)子(zi)能夠通過桿(gan)(gan)。四(si)極桿(gan)(gan)僅在施(shi)(shi)加(jia)RF電(dian)(dian)壓(ya)(ya)時用作離(li)子(zi)傳輸設備。

軸對稱的(de)(de)(de)(de)(de)Orbitrap質量(liang)分(fen)析(xi)儀(yi)包含一(yi)個紡錘狀的(de)(de)(de)(de)(de)中(zhong)心電(dian)(dian)極，該中(zhong)心電(dian)(dian)極被一(yi)對鐘形的(de)(de)(de)(de)(de)外部電(dian)(dian)極圍(wei)繞。運動的(de)(de)(de)(de)(de)離(li)子(zi)可(ke)能被靜電(dian)(dian)場捕獲(huo)。離(li)子(zi)在(zai)Orbitrap內部經過(guo)靜電(dian)(dian)場，迫使它們以復(fu)雜的(de)(de)(de)(de)(de)螺旋形運動。這(zhe)些振蕩的(de)(de)(de)(de)(de)軸向分(fen)量(liang)可(ke)以通(tong)過(guo)電(dian)(dian)極的(de)(de)(de)(de)(de)兩半檢測為鏡像電(dian)(dian)流。使用傅(fu)里(li)葉(xie)變換將圖像電(dian)(dian)流轉換為質譜圖。

LIT質量分析(xi)(xi)器(qi)是雙(shuang)(shuang)單元二維LIT質量分析(xi)(xi)器(qi)，由前轉移(yi)透(tou)鏡（TL1）、高壓LIT池、中(zhong)心(xin)轉移(yi)透(tou)鏡（TL2）、低(di)壓LIT池和(he)后轉移(yi)鏡頭（TL3）組成(cheng)。質量分析(xi)(xi)器(qi)單元內部是精(jing)密加工和(he)精(jing)確對齊的雙(shuang)(shuang)曲線桿的方形陣列，該桿具有(you)前、中(zhong)、后三個部分。

LIT質量(liang)(liang)分(fen)析儀進行的步驟包括離(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)存(cun)(cun)儲、離(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)隔離(li)(li)(li)(li)、碰撞誘導解離(li)(li)(li)(li)（CID）和離(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)掃(sao)描(miao)。對于(yu)SIM或MSn，LIT質量(liang)(liang)分(fen)析儀將離(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)隔離(li)(li)(li)(li)波形(xing)電壓(ya)(ya)(ya)施(shi)加(jia)到(dao)(dao)X桿(gan)上(shang)，同時主AC電壓(ya)(ya)(ya)斜率上(shang)升到(dao)(dao)新的存(cun)(cun)儲電壓(ya)(ya)(ya)，噴射(she)出(chu)除選(xuan)定m/z離(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)以(yi)外(wai)的所有離(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)。另(ling)外(wai)，對于(yu)MSn，LIT質量(liang)(liang)分(fen)析器將共振激(ji)發AC電壓(ya)(ya)(ya)施(shi)加(jia)到(dao)(dao)X桿(gan)上(shang)，以(yi)產(chan)生(sheng)CID。為了(le)掃(sao)描(miao)出(chu)離(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)，主RF電壓(ya)(ya)(ya)從低壓(ya)(ya)(ya)上(shang)升到(dao)(dao)高壓(ya)(ya)(ya)，同時MS向X桿(gan)施(shi)加(jia)共振噴射(she)AC電壓(ya)(ya)(ya)以(yi)促進噴射(she)。隨著(zhu)主RF電壓(ya)(ya)(ya)的增(zeng)加(jia)，m/z值(zhi)增(zeng)加(jia)的離(li)(li)(li)(li)子(zi)(zi)(zi)變(bian)得不穩定，并通過X桿(gan)中的槽噴出(chu)。

離子檢測系統

Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三(san)合(he)一質(zhi)譜儀具(ju)有(you)高(gao)靈敏度和(he)(he)離(li)軸離(li)子(zi)檢(jian)測(ce)系(xi)統。該(gai)檢(jian)測(ce)系(xi)統包含兩個(ge)轉換(huan)打拿極和(he)(he)一個(ge)電(dian)子(zi)倍增器。它可(ke)產生高(gao)信噪(zao)比（S/N），與檢(jian)測(ce)到的離(li)子(zi)數量成正(zheng)比，并且可(ke)以在正(zheng)負離(li)子(zi)工(gong)作模式之(zhi)間切換(huan)電(dian)壓極性(xing)。

Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一質(zhi)譜(pu)儀的掃描(miao)類型

MS掃(sao)描：MS掃(sao)描（或全掃(sao)描MS）對應的(de)是質(zhi)量分(fen)析(xi)的(de)單個階段。在這種掃(sao)描類(lei)型(xing)中(zhong)，離子源中(zhong)形(xing)成的(de)離子存儲在IRM中(zhong)，然后將離子轉(zhuan)移到Orbitrap或LIT質(zhi)量分(fen)析(xi)儀，以產生(sheng)質(zhi)量范(fan)圍內(nei)可(ke)觀察離子的(de)完整質(zhi)譜圖(tu)。MS掃(sao)描可(ke)用(yong)于(yu)定性和定量分(fen)析(xi)。此掃(sao)描類(lei)型(xing)還可(ke)用(yong)于(yu)確(que)定化合物的(de)分(fen)子量和強(qiang)度。

MS2掃(sao)描(miao)和MSn掃(sao)描(miao)：MS2掃(sao)描(miao)對應的(de)(de)(de)是MS/MS質(zhi)量分析。在(zai)MS/MS掃(sao)描(miao)的(de)(de)(de)第(di)1階(jie)(jie)段(duan)(duan)(duan)(duan)，我們可以使用四極桿(gan)或離(li)子(zi)(zi)(zi)阱來選擇(ze)離(li)子(zi)(zi)(zi)。然后將選定的(de)(de)(de)離(li)子(zi)(zi)(zi)轉(zhuan)移(yi)到(dao)IRM中(zhong)的(de)(de)(de)高(gao)能碰撞解(jie)離(li)（HCD）或CID、電子(zi)(zi)(zi)轉(zhuan)移(yi)解(jie)離(li)（ETD）或UVPD的(de)(de)(de)LIT中(zhong)。在(zai)MS/MS掃(sao)描(miao)的(de)(de)(de)第(di)二階(jie)(jie)段(duan)(duan)(duan)(duan)，產(chan)物離(li)子(zi)(zi)(zi)被轉(zhuan)移(yi)到(dao)軌道阱或LIT中(zhong)進(jin)行(xing)分析和檢測。在(zai)MSn掃(sao)描(miao)中(zhong)，n的(de)(de)(de)掃(sao)描(miao)功率通常為2到(dao)10，這意(yi)味著它涉及2-10個(ge)質(zhi)量分析階(jie)(jie)段(duan)(duan)(duan)(duan)。每個(ge)階(jie)(jie)段(duan)(duan)(duan)(duan)都包含一個(ge)離(li)子(zi)(zi)(zi)選擇(ze)步(bu)驟。掃(sao)描(miao)功率越高(gao)，可獲得的(de)(de)(de)化合物結構信息越多。

SIM掃(sao)描：選擇(ze)性離子(zi)監(jian)(jian)測（SIM）是質(zhi)量分析(xi)的單(dan)個階(jie)段，可以監(jian)(jian)測特定離子(zi)或(huo)一組離子(zi)。在這種掃(sao)描類型中，Orbitrap或(huo)LIT選擇(ze)并檢測m/z范圍內(nei)的離子(zi)，以產(chan)生SIM質(zhi)譜圖。

Thermo Orbitrap Fusion三合一(yi)高分(fen)辨質(zhi)譜儀的新技(ji)術(shu)

1. EASY-IC選擇。Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一(yi)質譜儀還有一(yi)個離(li)子(zi)源（RIS），位于(yu)電動離(li)子(zi)漏斗后面的API源接口(kou)中。此內(nei)部校(xiao)(xiao)準可將m/z分配精度提高(gao)到小于(yu)1 ppm。RIS生成內(nei)部校(xiao)(xiao)準離(li)子(zi)，以正負兩種模式對MS掃描(miao)進行實時質量校(xiao)(xiao)準。

2. EASY-ETD選擇(ze)。ETD是(shi)一種通過(guo)將電子轉移到多個帶電荷的(de)氣態(tai)分子上(shang)而使之分裂的(de)解離方法(fa)。ETD和EThcD HD模式在Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一質(zhi)譜(pu)儀中用(yong)于(yu)增加ETD光譜(pu)的(de)檢測限(xian)和動態(tai)范圍(wei)。

3. 紫外線光(guang)解離(li)（UVPD）選(xuan)擇。具有UVPD的(de)Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三(san)合(he)(he)一質譜儀提供了(le)額(e)外的(de)特別的(de)MSn功能。這種新穎的(de)片段化模式具有三(san)合(he)(he)一平(ping)臺的(de)多功能性，可以對蛋白(bai)質組學和代謝組學的(de)大分(fen)子(zi)和小分(fen)子(zi)進(jin)行深入的(de)結(jie)構分(fen)析。

4. 1,000,000 FWHM超高分辨(bian)率(lv)。具(ju)有MSn能力和多種(zhong)(zhong)碎片模(mo)式的超高分辨(bian)率(lv)可(ke)對多種(zhong)(zhong)分析物進行(xing)全面表征。

Thermo Orbitrap Fusion三合一高(gao)分辨質譜儀(yi)的(de)應用(yong)

Thermo Orbitrap Fusion三(san)合一高(gao)(gao)(gao)分辨(bian)質譜儀(yi)具有(you)出(chu)色的(de)(de)靈敏度(du)、選擇性和多功(gong)能性，可(ke)幫助獲(huo)得高(gao)(gao)(gao)質量的(de)(de)數據。該質譜儀(yi)配備有(you)亮度(du)高(gao)(gao)(gao)的(de)(de)離(li)子源、具選擇性的(de)(de)四極桿、快的(de)(de)離(li)子阱分析儀(yi)，完善(shan)的(de)(de)解離(li)技術和超高(gao)(gao)(gao)分辨(bian)率(lv)Orbitrap分析儀(yi)，適用于許多富有(you)挑戰性的(de)(de)應用。

翻(fan)譯(yi)后修飾（PTM）分析

PTM在(zai)蛋白質(zhi)(zhi)組學中起著重(zhong)要的作用，調節(jie)細(xi)胞(bao)活性定位(wei)，與其他細(xi)胞(bao)分(fen)子(zi)發生相互作用，如蛋白質(zhi)(zhi)、核酸(suan)、脂質(zhi)(zhi)和輔因子(zi)。Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一質(zhi)(zhi)譜儀具有CID、HCD、ETD和EThcD等多個片段，可(ke)用于PTM分(fen)析，尤其是糖基化分(fen)析。例如，ETD和EThcD可(ke)以(yi)提供(gong)糖肽主鏈(lian)片段化的MS/MS譜圖，從而找到準確的修(xiu)飾位(wei)點定位(wei)。

蛋白質定(ding)量(liang)

質(zhi)(zhi)譜在蛋白質(zhi)(zhi)定量(liang)(liang)中起(qi)重(zhong)要(yao)作用。使用同(tong)位素標簽的(de)多重(zhong)分析法被廣(guang)泛應用于蛋白質(zhi)(zhi)豐(feng)度(du)的(de)高(gao)(gao)通量(liang)(liang)定量(liang)(liang)比(bi)較(jiao)。Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一質(zhi)(zhi)譜儀可(ke)(ke)以(yi)執行同(tong)量(liang)(liang)異位素標記TMT，能夠以(yi)高(gao)(gao)定量(liang)(liang)精(jing)度(du)同(tong)時分析10個(ge)樣品。Orbitrap Fusion Lumos具有高(gao)(gao)選擇性(xing)和(he)更(geng)高(gao)(gao)的(de)靈敏度(du)，可(ke)(ke)實現良佳性(xing)能，同(tong)時可(ke)(ke)保(bao)持對(dui)低(di)豐(feng)度(du)分析物(wu)定量(liang)(liang)的(de)高(gao)(gao)重(zhong)現性(xing)。

完整蛋白質(zhi)分析(xi)

自上而下(xia)的(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質(zhi)(zhi)組(zu)學通常(chang)分析(xi)的(de)(de)(de)是(shi)完(wan)整(zheng)(zheng)的(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質(zhi)(zhi)，通過質(zhi)(zhi)譜儀中完(wan)整(zheng)(zheng)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)片段化，提供有關PTM、蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質(zhi)(zhi)異構體(ti)和蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質(zhi)(zhi)序列的(de)(de)(de)信(xin)息。Orbitrap Fusion Lumos MS配(pei)備了(le)真空技術，能(neng)夠為(wei)分析(xi)完(wan)整(zheng)(zheng)的(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)提供優化條件。結(jie)合多樣性碎片，Orbitrap Fusion Lumos MS的(de)(de)(de)ETD HD可(ke)以提供改進的(de)(de)(de)檢測限和動態范圍，從而在更快的(de)(de)(de)捕(bu)獲速率(lv)下(xia)獲得更大(da)的(de)(de)(de)序列覆(fu)蓋率(lv)。此(ci)外(wai)，它還可(ke)用于重鏈和輕鏈的(de)(de)(de)完(wan)整(zheng)(zheng)單(dan)克隆(long)抗體(ti)的(de)(de)(de)高精度質(zhi)(zhi)量分析(xi)。

小分子(zi)分析

由于(yu)其高靈(ling)敏度和高分辨率(lv)，Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一質譜儀可(ke)用(yong)于(yu)鑒(jian)定和定量小分子(zi)。由于(yu)可(ke)以觀(guan)察到精細的(de)同位素(su)結構，可(ke)以用(yong)于(yu)測定高精度的(de)分子(zi)式。這種直接測量消除了模式匹配估計(ji)的(de)模糊(hu)性。此外，更明亮的(de)離子(zi)源使(shi)它能達(da)到更低的(de)定量水平。

Thermo Scientific公司的Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一質譜儀(yi)具有(you)某些高級功能，包(bao)括新(xin)型API接口(kou)、四(si)極桿技術、高場Orbitrap分析(xi)(xi)儀(yi)和(he)雙壓線(xian)性離(li)子(zi)阱。特別的儀(yi)器(qi)架構可在(zai)任何(he)碎片(pian)化(hua)階段執行多種解(jie)離(li)技術，如HCD和(he)CID，并在(zai)線(xian)性離(li)子(zi)阱或Orbitrap質量分析(xi)(xi)儀(yi)中分析(xi)(xi)離(li)子(zi)。