研究背景

亞(ya)硝(xiao)胺類雜質(zhi)屬于ICH M7（R1）《評估和控制藥物中DNA反應性（致突變）雜質以限制潛在致癌風險》指南中提及的"關注隊列"物質；其中根據世界衛生組織公布的致癌物清單，NDMA和NDEA均屬于2A類致癌物質，因此亞硝胺類（NDMA和NDEA）雜質應在藥品中予以嚴格控制，基因毒性雜質由于控制限度低，基質復雜，需要開發和使用高靈敏度高選擇性的定量檢測方法。本方案在文獻基(ji)礎上^[1][2][3]，開(kai)發建立了基于APCI源的LC-MS/MS方法，用(yong)于痕量(liang)的NDMA和(he)NDEA分析檢測，該方法具有準確、靈敏、快速的(de)特點。

實驗部(bu)分

儀器、試(shi)劑與材(cai)料

·Thermo Scientific? Vanquish?超高效液相(xiang)色譜

·Thermo Scientific? TSQ Altis?三重(zhong)四(si)極桿質譜，配APCI源

·Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18, 3.0 x 150 mm, 2.7 μm

·蒸餾(liu)水（屈臣氏）、甲醇、甲酸（色譜純）

實驗方法

色譜(pu)條件

色譜柱：Poroshell 120 EC-C18（3.0 x 150 mm, 2.7 μm）

流速：0.40mL/min

柱溫：40℃

進樣(yang)量(liang)10μL

質譜(pu)條(tiao)件：

離(li)子源參數

SRM掃描模式(shi)

結果與討(tao)論(lun)

儀(yi)器(qi)靈敏(min)度(du)、線性范圍和(he)精密度(du)

將(jiang)高濃(nong)度標(biao)準(zhun)品逐級稀(xi)釋，配制成(cheng)系列標(biao)準(zhun)曲線(0.2、1、5、10、50、100、200ng/mL)考察儀器靈敏度、重(zhong)現性和(he)線性范圍(wei)。

靈敏度：結果表(biao)明NDMA和(he)NDEA的LOD（S/N≥3）均為0.1ng/mL。

線性范圍：NDMA和NDEA在0.2~200ng/mL濃度(du)范圍內呈良好的線性關系(xi)。

重現(xian)性：結果表明，連續進樣(yang)6針，NDMA和NDEA的RSD值＜5%，具有非(fei)常(chang)好的(de)重現性。

樣(yang)品分析

檢測(ce)5例客(ke)戶樣(yang)本，按(an)照本文所建立方法(fa)進(jin)行分析(xi)。由下(xia)圖(tu)可以看出，NDMA和(he)NDEA得到了比較好的分析結果(guo)，各離子通(tong)道在掃描時間內(nei)不存在干擾峰，可準(zhun)確定(ding)量定(ding)性。

結論

本方案建立了基于APCI源的(de)LC-MS/MS分(fen)析方法，用于測定NDMA和NDEA。該方法分析速度快，靈敏度高，能夠滿足NDMA和NDEA的分析要求，適合大批量定性和定量分析。

參考文(wen)獻：

[1]徐(xu)艷梅(mei), 韓彬, 閆(yan)凱, 等. 高效(xiao)液相色譜-串聯質譜法同時檢測irbesartan原料藥及(ji)其片劑中3種N-亞(ya)硝胺類(lei)基因毒性雜質[J]. 藥(yao)物分析雜志, 2021, 41(4): 720 - 726.

[2]Fritz S?rgj, Martina Kinzig, Mona Abdel - Tawab, et al. The contamination of valsartan and other sartans, part 1: New findings[J]. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2019, 172: 395 - 405.

[3]Yamamoto, E., Kan-no, H., Tomita, N., Ando, D., Miyazaki, T., & Izutsu, K. (2022). Isolation of N-nitrosodimethylamine from drug substances using solid-phase extraction-liquid chromatography-tandem mass spectrometry. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 210, 114561.